Kloning Fragmen Klenow DNA Pol UPER 2 dan Karakterisasinya

Abstract

DNA polimerase memiliki peranan yang sangat penting terhadap duplikasi seluruh genom yang disebut sebagai ”enzim replikasi”. Enzim DNA polimerase juga berperan penting terhadap biologi molekuler dan bioteknologi modern, seperti kloning DNA, reaksi berantai polimerase (PCR), sekuensing DNA, deteksi polimorfisme nukleotida tunggal (SNP), amplifikasi seluruh genom (WGA), biologi sintetik, dan diagnostik molekuler. Dalam bidang bioteknologi, DNA polimerase yang digunakan umumnya adalah DNA polimerase yang tidak memiliki aktivitas 5’-3’ eksonuklease. Pada penelitian ini telah diklon fragmen klenow DNA pol UPER 2 dan dikarakterisasi menggunakan situs komputasi dengan metode BLASTX. Amplifikasi fragmen klenow DNA pol UPER 2 dilakukan dengan menggunakan primer DPBF dan DPBR. Kloning fragmen klenow dilakukan dengan vektor Pjet 1.2/blunt. Hasil analisis bioinformasi urutan sekuensing DNA menunjukkan bahwa fragmen klenow DNA pol UPER 2 telah berhasil diklon dengan vektor pJET 1.2/blunt.